Prosedyren for å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemeter å identifisere antigener A og B i erytrocytter ved bruk av standard antistoffer og bruk av agglutininer i plasma eller serum i blodet som analyseres ved standard røde blodlegemer. Teknikken ble utviklet i begynnelsen av 1900-tallet og brukes fortsatt aktivt i medisin. Bestemmelse av antigener A og B skyldes anti-A og anti-B-zeolitoner.

Grunnleggende begreper

Donorer er alltid bestemt ikke bare av antigeneri erytrocytter, men også agglutininer i serum (plasma) ved bruk av standard erythrocytter. Venøst ​​blod brukes som biomateriale. Før testen må du gi opp fettstoffer en dag før testen og ikke røyke i en halv time før du tar testen. Blodgruppene bestemmes to ganger: først i behandlingsavdelingen, hvor materialet høstes, og deretter bekreftes av en undersøkelse i laboratoriet.

Blodgruppebestemmelse unngår i krysset

Definisjonen av blodgrupper i henhold til ABO-systemet erHovedprøven brukt i transfusiologi. Også et lignende system av blodgrupper er tilstede hos noen dyr, for eksempel i sjimpanser, gorillaer og bonoboer.

Oppdagelseshistorie

I vitenskap er det et generelt akseptert syn påMetoden for å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemet ble først avslørt av Karl Landsteiner, en østerriksk forsker, i 1900. Deretter beskrev han i sitt arbeid tre typer antigener. For dette i tretti år ble han tildelt Nobelprisen i medisin og fysiologi. På grunn av det faktum at det ikke var nært forhold mellom forskerne, oppdaget de senere at den tsjekkiske serologen Jan Janski, uavhengig av K. Landsteiner, for første gang beskrev fire menneskelige blodgrupper, men hans studier var ikke kjent for et bredt publikum. For tiden er det klassifiseringen utviklet av J. Jansky som brukes i Russland og republikkene i den tidligere Sovjetunionen. I USA opprettet WL Moss sitt lignende arbeid i 1910.

blodgrupperingsteknikk

Metoden for å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemet ved bruk av tsoliklonov

Blodgruppen bør bestemmes innendørs medgod belysning med et temperaturområde på 15 til 25 grader Celsius, siden avvik fra denne normen kan påvirke resultatene av studien. Forskriftene og etternavnet til pasienten er skrevet på platen eller platen. Fra venstre til høyre eller rundt sirkelen blir standardnotasjonen for grupper (O (I), A (II), B (III)) påført. Under dem plasseres passende serum dråpevis av separate pipetter for hver art. Da blir pasientens blod lagt til dem. Materialet til forskning er hentet fra øret eller fingeren. Dette krever teknikken for å bestemme blodgruppen i henhold til ABO-systemet.

Bruken av erytrocytter,som er i røret etter at koagulasjonen dannes. Det er nødvendig at mengden serum er mer enn mengden tilsatt blod tifold. Derefter blandes dråper med glasspinner (separat for hver). Innen fem minutter, forsiktig rocking platen, ser etter utseendet av en hemagglutineringsreaksjon. Det er funnet i det faktum at små røde klumper ser ut, smelter sammen til større. Serum på dette tidspunktet taper nesten helt farge.

For å eliminere falsk hemagglutineringEnkel liming av erytrocytter, det er nødvendig å legge til en dråpe fysiologisk oppløsning etter tre minutter og undersøke om agglutinering forblir. I så fall er det sant. Alt, definisjonen av blodgrupper i henhold til ABO-systemet på dette er fullført.

Definisjon av blodgrupper ved avo systemet

Tolkning av resultater

Som et resultat kan det være fire reaksjoner:

  • ingen agglutinasjon oppstår med noen av sera - den første gruppen av O (I);
  • reaksjonen ble manifestert med sera I (ab) og III (a) - den andre gruppe A (II);
  • agglutinering skjer med sera I (ab) og II (b) - den tredje gruppe B (III);
  • hvis reaksjonen skjer med tre sera,Det er nødvendig å utføre en ytterligere prosedyre med AB (IV) gruppe reagenser, som er standard; Hvis det ikke er agglutinering i en slik dråpe, kan vi anta at dette er den fjerde blodgruppen AB (IV).

Ekspressmetode for Rh-faktor

Metoden for å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemet antar samtidig detektering av Rh-faktoren (Rh).

Overflaten på platen er for-fuktet ogde skriver på det "kontroll serum" og "antiresus serum". Deretter plasseres en eller to dråper av de nødvendige reagensene under innskriftene, og det analyserte materialet blir tilsatt dem. For å gjøre dette kan du også bruke blod fra fingeren (i samme mengde som serumets volum) eller røde blodlegemer igjen på bunnen av røret etter utseende av blodproppen (halv volum av serum). Valg av materiale til sluttresultatet påvirkes ikke. Deretter blandes blodet og serumet med en tørr glassstang, hvorpå de venter på at reaksjonen skal skje i fem minutter. For å eliminere falske avlesninger, etter tre til fire minutter, tilsettes en isotonisk løsning av natriumklorid (bare noen få dråper). Bestemmelsen av blodgruppen i henhold til ABO og Rh-systemet utføres ofte.

algoritmen for å bestemme blodgruppen av avo systemet

Hvis agglutinering av erytrocytter i en dråpe medserum oppstår, dette indikerer et positivt Rhesus-blod. Ifølge statistikken forekommer Rh + i 85% av verdens befolkning. Mangelen på det tillater oss å snakke om Rh-negativ tilhørighet. Hvis agglutinering dukket opp i kontrollserumet, har det blitt ubrukelig. Dessverre fungerer algoritmen for å bestemme blodgruppen i henhold til ABO-systemet ikke alltid perfekt.

Hvilke feil kan gjøres med denne teknikken?

Unøyaktigheter ved å bestemme blodet som tilhører en bestemt gruppe er avhengig av følgende årsaker:

  • Teknisk.
  • Biologisk spesifisitet av blodet.
  • Den ufullstendige karakteren til standard sera og erytrocytter.

Tekniske feil

Mulige feil ved å bestemme blodgruppen av ABO-systemet på en kryssvei:

  • Feil serum på platen.
  • Feil kvantitative proporsjoner av materialet.
  • Bruk av utilstrekkelig rene plater ellerplater som kommer i kontakt med blod (hvert serum skal samles inn av en separat pipette, som skal vaskes med en oppløsning av natriumklorid (i en konsentrasjon på 0,9%)).
  • Feil registrering av det analyserte materialet.
  • Manglende overholdelse av tiden som kreves forbegynnelsen av agglutinering - det er ikke nødvendig å skynde og ta hensyn til reaksjonen før utløpet av fem minutter, fordi blodet kan ha svake agglutinogener. For å overdrive er det heller ikke nødvendig, fordi dråpene kan tørke fra kantene og føre til en falsk konklusjon. Det er viktig å følge reglene for å bestemme blodgruppen i henhold til ABO-systemet.
    bestemmelse av blodgrupper ved avo systemet ved bruk av standard sera
  • Feilaktig sentrifugering kan også føre til et falskt resultat.
  • Lufttemperatur overstigende tillatt,påvirker fraværet av agglutinering. For å unngå feil av denne typen, må du bruke et spesielt serum, designet for å fungere i varme klima. Bestem blodgrupper på en tallerken eller plate, hvis ytre overflate faller i kaldt vann.

Biologiske spesifisitetsfeil

Feil knyttet til den biologiske spesifisiteten av blodet som analyseres, er delt inn i to typer.

  • Avhengig av egenskapene til røde blodlegemer.
  • Feil på grunn av serumets biologiske egenskaper.

La oss vurdere hver art nærmere.

Avhengig av egenskapene til røde blodlegemer

  • Sen agglutinering, på grunn av "svak"former for erytrocytter og antigener. For å unngå feil, er det nødvendig å bestemme blodgruppen av givere og mottakere ved bruk av standard erythrocytter. Identifiser agglutinogen A2 bør undersøkes med andre typer reagenser og andre retter, og øker reaksjonstidens opptakstid.
  • "Panagglutinering" ("autoagglutinering") - ferdighetblod for å vise den samme reaksjonen av en ikke-spesifikk natur med alle sera, inkludert sin egen. Etter fem minutter svekkes akutten av slik agglutinering, selv om den bør intensiveres. Lignende tilfeller blir observert hos kreftpasienter, brent osv. Som kontroll er det nødvendig å evaluere manifestasjonen av agglutinering av de analyserte erytrocytter i standardserum i fjerde gruppe og saltoppløsning. Ved "panagglutinering" bestemmes blodgruppen som et resultat av tredobbelt vasking av erytrocytter. Hvis det ikke gir det ønskede resultatet, er det verdt å samplere blodprøven i et forvarmet rør og plassere prøven i en termobeholder for å opprettholde en temperatur på 37 grader Celsius og over. Deretter skal den leveres til et laboratorium der temperaturen ovenfor holdes og oppvarmet fysiologisk saltvann, tallerken og reagenser brukes.

regler for å bestemme blodgruppen av avo systemet

  • Noen ganger blir blodets røde blodlegemer analyserter arrangert som "mynter", og de kan tas som agglutinater. Hvis du legger til to dråper isotonisk løsning og forsiktig plater platen, tar de røde blodcellene riktig posisjon.
  • Ufullstendig eller blandet agglutinasjon som forekommer hos pasienter med andre, tredje og fjerde gruppe som følge av benmargstransplantasjon eller i de første tre månedene etter blodtransfusjon 0 (I).

På grunn av serumets biologiske egenskaper

  • Under rutinemessig testing som et resultatDen forrige sensibiliseringen avslørte antistoffer av forskjellig spesifisitet. Vi må bestemme det og hente røde blodlegemer uten innholdet av antigenet til hvilken immunisering detekteres. Mottakeren må nødvendigvis velge kompatibelt donorblod individuelt.
  • Det finnes ingen antistoffer A og B, som observeres hos nyfødte og pasienter som lider av undertrykkelse av humoral immunitet.
  • Når du danner "mynter" uregelmessigResultatet må bekreftes ved å ta standard røde blodlegemer fra den første gruppen. En løsning av natriumklorid og rocking platen hjelper å skille de virkelige agglutinatene og "mynter".
    bestemmelse av blodgrupper ved avo systemet ved hjelp av tsolibones

Feil forbundet med bruk av dårligere standard erythrocytter og sera

Svak sera med fortid holdbarhet eller har en titer på mindre enn 1:32 kan starte svak og sen agglutinering. Bruk av slike reagenser er uakseptabelt.

Bruk av uegnet standard røde blodlegemereller myse, preparert under ikke-sterile forhold og konservert i en utilstrekkelig grad, fører til forekomsten av "bakteriell" agglutinering, som er av usynlig karakter.

Det er mange populære antakelser omblodgrupper av ABO-systemet, som dukket opp umiddelbart etter deteksjonen i forskjellige verdenskulturer. Så for eksempel i 30-tallet i forrige århundre i Japan og noen andre land, ble teorien som knyttet blodgruppen til en eller annen type personlighet, blitt populær. Lignende teorier er populære i dag.

Det er også meningen at en person som har gruppe A er utsatt for en alvorlig bakrus, O er knyttet til gode tenner, og gruppe A2 - med høyeste nivå av IQ. Men slike påstander er ikke vitenskapelig bevist.

Vi undersøkte definisjonen av blodgrupper ved hjelp av ABO-systemet ved bruk av standard sera.

</ p>